Miglė Kalvaitytė-Repečkė apgynė disertaciją „Genetinių įrankių kūrimas ir pritaikymas Tcf21 vaidmens širdies regeneracijoje tyrimams” ir jai buvo suteiktas biologijos mokslo krypties daktaro laipsnis.
Mokslinis vadovas dr. Darius Balčiūnas (Vilniaus universitetas/Templ universitetas, gamtos mokslai, biologija).
Disertacijos gynimo tarybos sudėtis: Tarybos pirmininkas - dr. Arvydas Lubys (Vilniaus universitetas, gamtos mokslai, biologija); dr. Jonathan Arias (Vilniaus universitetas, gamtos mokslai, biologija), dr. Thomas Juan (Upsalos universitetas, Švedija, gamtos mokslai, biologija), dr. Shih-Lei (Ben) Lai (Sinica akademija, Taivanas, gamtos mokslai, biologija), dr. Skaistė Sendžikaitė (Vilniaus universitetas, medicinos ir sveikatos mokslai, medicina).
Zebrinės danijos (Danio rerio), priešingai nei suaugę žinduoliai, geba atstatyti pažeistą širdies audinį, todėl yra puikus modelinis organizmas tirti širdies regeneracijos molekulinius mechanizmus. Ankstesni tyrimai parodė, jog epikardas, išorinis širdies sluoksnis, skatina širdies regeneraciją po pažeidimo. Transkripcijos veiksnys Tcf21 yra būtinas tinkamam epikardo formavimuisi vystymosi metu. Tačiau jo funkcija suaugusios zebrinės danijos širdyje iki šiol mažai ištirta, nes šio geno nokautai yra mirtini ankstyvo vystymosi metu.
Šio darbo tikslas buvo nustatyti Tcf21 vaidmenį zebrinių danijų širdies regeneracijos metu. Tikslui pasiekti buvo sukurtas sąlyginis tcf21 geno alelis. Panaudojant visame organizme ekspresuojamą, tamoksifenu aktyvuojamą CreERT2 rekombinazę, mes sėkmingai išjungėme geno raišką tiek lervoje, tiek suaugusioje žuvyje. Rezultatai parodė, jog Tcf21 yra svarbus sėkmingai širdies regeneracijai. Jo nebuvimas sąlygoja didesnį jungiamojo audinio kiekį pažeidimo vietoje praėjus 60 dienų po pažeidimo. Mes nustatėme, kad Tcf21 funkcija skatina dediferencijuotų kardiomiocitų įsiskverbimą į pažeidimo vietą, tačiau nepaveikia jų proliferacijos. Taipogi mes sukūrėme transgeninę zebrinių danijų liniją, leidžiančią aktyvuoti trigubu HA epitopu žymėto Tcf21 raišką. Ši linija gali būti panaudota siekiant nustatyti tiesioginius Tcf21 taikinius vystymosi ir regeneracijos metu.
Apibendrinant, šio tyrimo metu buvo pateiktos naujos įžvalgos į epikardo vaidmenį širdies regeneracijoje ir sukurti universalūs genetiniai įrankiai, leidžiantys tolesnius Tcf21 reguliuojamų procesų tyrimus.
 |